| 名前 | |
| マリオ | 我らが主人公。今回もピーチを助けに行く土管工 |
| ピーチ姫 | キノコ王国のお姫様。今回もさらわれる |
| ヨッシー | マリオの相棒?でおなじみの、緑のアレ。 でっていうかわいいよ、でっていう。 |
| キノピオ | キノコ王国に住むキノコ族。宇宙でマリオと再開して以来、キノピオ探検隊を再結成して各地で手助けしてくれる。赤が隊長 |
| ルイージ | マリオの弟。通称「みどりのヒゲ」 マリオより高くジャンプできるが滑りやすく急には止まれない。根暗な性格で、オバケが嫌い。 |
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| ルーバ | 宇宙を旅するチコの親分。星船マリオを作ってくれる |
| ベビィチコ | マリオの帽子の中に入り、一緒に冒険をしてくれる相棒。このチコのおかげでスピンができる。チコ仲間から「チコ様」と呼ばれている |
| チコ | 宇宙に住む星の子たちの総称。スターピースが大好物 |
| ハラペコチコ | ピンクの太ったチコ。スターピースかコインを指定された数だけあげると、新たな道が開けたりする。 |
| よろずやチコ | 水色の太ったチコ。各地にチコショップを展開し、スターピースを指定された数あげると、1UPキノコかライフUPキノコの好きなほうを貰える |
| アシストチコ | 2Pプレイのときにマリオを助ける役目のオレンジのチコ。今作のロゴの右上にいる子。 |
| 星ウサギ | ぴょんぴょん跳びはねる白いウサギ。耳先だけ色がついているのが特徴。ジャンプと追いかけっこが大好き。 |
| ペンギン | 水や氷のステージに登場。デカいペンギンはいろいろとエライ立場にいるキャラクターであることが多い。(仙人とかコーチとか) |
| ハニービー | ミツバチの一族。前作では一国の主だったハニークイーン(女王様)は、今作ではハニービー村を治める立場。でも周囲からの呼び方は「女王様」。女王と村長じゃ、えらい違いだ。 |
| モック | 木の民。積み木のような顔が特徴。カタコトで喋る。ユウキをもつことが誇り。 |
| パマタリアン | パーマに見せかけた歯車の頭を持つ、関西弁のロボット。名前の由来はおそらくパーマ+オバタリアン。お掃除が大好き。星船マリオにやってくる金銀のパマタリアンは、パマコとパマミという名前。 |
| ピーチャン | ジャングルに住む鳥。同じ言葉を2度くり返す。 |
| モンテ | スカイビーチに住む水色のハワイアンな人。頭にヤシの木が生えている。 |
| あかボムへい | 赤いボムへい。敵のボムへいとは違い、マリオたちに協力してくれる。 |
| グライバード | ジャングルに住む飛べない鳥・・・だったが、マリオのおかげで飛べた。 |
| さすらいの遊び人 | World1 もくもくけいこくギャラクシーに登場する青いサル。その後、手紙を受け取ると隠しステージをプレイできるようになる。決して「バナナアタマ」と呼んではいけない。マリオにミニゲームをさせるためなら、一ヶ月かかる工事も頑張る。 |
| カン・バーン | その名の通り看板。喋る。口が悪い。自分を「カン・バーン様」と呼ぶなど、俺様キャラらしい。 |
| ロゼッタ | 前作でピーチ姫と並んでヒロインを務めた。ほうき星の天文台の主で、チコたちからはママと呼ばれている。 |
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| クッパ | 今回、なんとパワースターを手に入れたおかけで巨大化して登場。マリオシリーズおなじみのボスキャラ。ピーチをさらった張本人 |
| クッパJr. | クッパの息子。わがままで生意気だが、頭は良いとされている。偉そうな言動とは裏腹に、父クッパを「お父さん」と呼ぶなど、まだまだ子供の部分は多い。母親はいまもって不明。 |